采樣收集:采集環(huán)境中的樣本,例如水、土壤、空氣等,這些樣本可能含有生物體在環(huán)境中釋放的DNA碎片。
提取DNA:因環(huán)境樣本較為復(fù)雜,故提取是一大困難點。根據(jù)樣本種類和研究物種,選擇高效的DNA提取方法是關(guān)鍵。
文庫構(gòu)建:將提取的eDNA樣本進行文庫構(gòu)建。一般有兩種構(gòu)建方法,一是宏基因建庫,另一種是eDNA宏條形碼,即擴增子建庫。
高通量測序:經(jīng)過文庫構(gòu)建后,使用高通量測序技術(shù),如Illumina、華大智造等,對eDNA樣本進行測序。這些平臺可以高效地產(chǎn)生大量的DNA序列數(shù)據(jù)。
數(shù)據(jù)分析:對測序得到的數(shù)據(jù)進行分析。這可能包括序列比對、物種鑒定、多樣性分析等,用于確定樣本中存在的生物物種及其數(shù)量。
eDNA測序技術(shù)在生態(tài)學(xué)、環(huán)境監(jiān)測、物種分布和多樣性研究中具有重要意義。它能夠非侵入性地監(jiān)測環(huán)境中存在的生物種類,幫助研究人員了解特定地區(qū)的生物多樣性、環(huán)境健康狀況以及生態(tài)系統(tǒng)的變化。
通過對eDNA的測序分析,科學(xué)家們可以更全面地了解自然環(huán)境中的生物多樣性,監(jiān)測瀕危物種、入侵物種以及環(huán)境變化對生態(tài)系統(tǒng)的影響。這種技術(shù)對于生物保護、環(huán)境管理和生態(tài)風(fēng)險評估具有重要的應(yīng)用價值。