由Rui Benedito領(lǐng)導(dǎo)的國(guó)家心血管研究中心(CNIC)的一組科學(xué)家開(kāi)發(fā)了一種名為iSuRe-HadCre的新型遺傳工具，可以高效可靠地誘導(dǎo)整個(gè)組織或單個(gè)細(xì)胞的精確遺傳改變。這項(xiàng)新技術(shù)將成為生物醫(yī)學(xué)研究的重要工具，利用小鼠模型來(lái)修改和了解基因功能。
幾十年來(lái)，分析基因功能的金標(biāo)準(zhǔn)方法一直是有條件的cre重組酶遺傳學(xué)，它提供了對(duì)基因改變或基因表達(dá)的精確控制。盡管出現(xiàn)了CRISPR/Cas9等新的基因靶向技術(shù)，但小鼠模型中的Cre-Lox系統(tǒng)在生物醫(yī)學(xué)研究中的效率、精度和廣泛適用性方面仍然無(wú)與倫比。這種方法允許研究人員在時(shí)間和空間上操縱基因表達(dá)，使研究特定組織和特定生物或疾病背景下的基因功能成為可能。
然而，Cre-Lox系統(tǒng)的一個(gè)主要缺點(diǎn)是其在cre介導(dǎo)重組的效率和時(shí)間控制方面不可避免的可變性，這取決于所使用的特定轉(zhuǎn)基因和固定等位基因。這種可變性需要使用多種和昂貴的遺傳和分子控制來(lái)確認(rèn)每個(gè)依賴于cre的條件遺傳實(shí)驗(yàn)都按預(yù)期工作。
為了克服這些限制，由Rui Benedito領(lǐng)導(dǎo)的CNIC團(tuán)隊(duì)先前開(kāi)發(fā)了iSuRe-Cre技術(shù)，這是一種轉(zhuǎn)基因小鼠模型，將永久Cre活性與熒光報(bào)告基因的表達(dá)聯(lián)系起來(lái)。這克服了假陽(yáng)性的問(wèn)題和需要昂貴的額外檢查和控制來(lái)驗(yàn)證對(duì)目標(biāo)基因的適當(dāng)修改。然而，第一代iSuRe-Cre等位基因仍然存在局限性，包括在某些細(xì)胞類型中偶發(fā)泄漏，對(duì)Cre活性的敏感性相對(duì)較低，以及在Cre高表達(dá)和永久表達(dá)的細(xì)胞中可能存在毒性。
在這項(xiàng)新研究中，CNIC團(tuán)隊(duì)開(kāi)發(fā)了一種名為iSuRe-HadCre的新基因工具，克服了這些限制。第一作者Irene García González說(shuō):“該工具使用了一種新型的可誘導(dǎo)雙重組酶基因級(jí)聯(lián)，確保熒光報(bào)告基因在以前具有但不再具有高Cre活性的所有細(xì)胞中表達(dá)。”
García González解釋說(shuō):“Cre的這種短暫表達(dá)足以有效地刪除loxP兩側(cè)的所有基因，同時(shí)避免Cre永久表達(dá)引起的毒性。此外，新系統(tǒng)在任何細(xì)胞類型中都沒(méi)有泄漏，并且對(duì)CreERT2及其配體他莫昔芬的誘導(dǎo)更加敏感。”
Rui Benedito預(yù)測(cè)，“iSuRe-HadCre的這些特點(diǎn)和優(yōu)越的性能將使其成為所有實(shí)驗(yàn)室使用小鼠模型進(jìn)行條件遺傳研究不可或缺的工具。”
Benedito補(bǔ)充說(shuō)，iSuRe-HadCre“對(duì)于成像研究、單細(xì)胞遺傳分析和需要同時(shí)高效可靠地修改多個(gè)基因的遺傳上位性研究尤其有價(jià)值。”
（文章來(lái)源：www.ebiotrade.com/newsf/2024-6/20240612035617475.htm） | 
