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孟藏龍:禽白血病凈化易出現(xiàn)“錯(cuò)殺“和”漏檢”,在檢測試劑盒選取時(shí)需關(guān)注4大點(diǎn)
[ 發(fā)布日期:2023-8-2 9:13:04    閱讀次數(shù):588 ]

“從當(dāng)前的研究現(xiàn)狀看,禽白血病沒有特效藥和有效的疫苗,因此想從保護(hù)易感動物這一層面來實(shí)現(xiàn)禽白血病的防控希望渺茫,經(jīng)過多年實(shí)踐摸索,國內(nèi)外逐漸形成了以檢測淘汰和生物安全防控這兩種方式來進(jìn)行禽白血病的凈化。”

在第32屆廣東省畜牧獸醫(yī)科技大會家禽業(yè)高質(zhì)量發(fā)展論壇上,孟藏龍對禽白血病的流行和檢測現(xiàn)狀做了專題報(bào)告。

01

 

 

禽白血病存在四大凈化難點(diǎn)
 

禽白血病是一類由禽白血病病毒引起的家禽多種腫瘤性疾病的總稱。孟藏龍介紹,根據(jù)病毒血清中和試驗(yàn)、病毒干擾模式、囊膜蛋白不同和基因組的分子生物學(xué)特性,可將禽白血病分為11個(gè)亞群,其中在自然狀態(tài)下感染雞的只有ALV-A/B/C/D/E/J/K這七個(gè)亞群。他提醒,禽白血病作為一種重要的垂傳疾病,一只感染的曾祖代雞在不檢測淘汰的情況下會導(dǎo)致24萬只商品代雞感染。而感染的雞群會出現(xiàn)高死淘、產(chǎn)蛋下降、生長緩慢和免疫抑制等情況,給世界養(yǎng)雞業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失,因此對于種禽企業(yè)來說要引起特別的重視。在會上,孟藏龍回顧了全球禽白血病流行的歷史事件,并總結(jié)出不規(guī)范引種和飼養(yǎng)是造成ALV在國內(nèi)流行的主要原因。
       “不同亞群的ALV毒株在雞群中的流行特點(diǎn)各不相同,”孟藏龍針對這種情況做了詳細(xì)的介紹。他總結(jié)道,“當(dāng)前禽白血病還是以J亞群感染為主,檢出率達(dá)到90%以上;經(jīng)典毒株雖然檢出較少,但是依然零星存在;而在東亞地區(qū)的地方品種雞中存在的ALV-K在最近幾年檢出率越來越高,而且多種亞群ALV在同一場內(nèi)混合感染的情況并不少見。”

禽白血病凈化過程中容易出現(xiàn)假陽性錯(cuò)殺,假陰性漏檢的情況。”孟藏龍表示,該病在診斷淘汰層面主要存在以下四大難點(diǎn):

1、內(nèi)源性ALV會干擾診斷,而很多養(yǎng)殖企業(yè)沒有條件做病毒分離;

2、診斷試劑產(chǎn)品質(zhì)量差異很大,主要體現(xiàn)在敏感性差和重復(fù)性差這兩個(gè)方面;

3、ALV-K亞群的診斷未引起足夠的重視,漏檢情況嚴(yán)重;

4、ALV亞群眾多,病毒變異或不同亞群之間的病毒重組現(xiàn)象多有發(fā)生。

02

 

 

病毒分離和elisa方法是實(shí)現(xiàn)禽白血病凈化的核心手段

對此,禽白血病的凈化要求具備高效精準(zhǔn)的檢測手段。孟藏龍介紹,目前常用的禽白血病原檢測方法主要有病毒分離、ELISA、膠體金、PCR和IFA等。其中,以檢測群特異性P27抗原的病毒分離技術(shù)和elisa檢測方法是實(shí)現(xiàn)禽白血病凈化的核心手段。

會上,孟藏龍展示了對幾家商品化的禽白血病p27抗原檢測試劑盒性能所做的大量比對數(shù)據(jù),通過比較發(fā)現(xiàn),不同來源產(chǎn)品的檢測性能參差不齊,主要體現(xiàn)在敏感性和重復(fù)性這兩個(gè)方面。在試劑盒敏感性比較上,不同試劑盒對不同樣本的檢出率相差較大,特別針對臨床樣本檢出率甚至有1倍的差距;不同試劑對不同亞型病毒的檢出率也不同,針對復(fù)制速度較慢的ALV-K的檢出上表現(xiàn)的更為明顯,而敏感性高的試劑盒有利于早期檢出,大大減少凈化成本。在重復(fù)性上,2年前很多國產(chǎn)和進(jìn)口產(chǎn)品的CV值普遍在10%-15%,甚至高于15%,試劑盒反復(fù)波動會引起監(jiān)測數(shù)據(jù)和凈化檢測結(jié)果不準(zhǔn)確而誤判,進(jìn)而影響凈化效果評估和檢測淘汰。

與此同時(shí),他還提出了選擇P27抗原ELISA試劑盒的4大建議

1. 基于科學(xué)的評價(jià)體系選取的產(chǎn)品更可靠,實(shí)踐出真知;

2. 不同試劑盒的批間、批內(nèi)差較大,應(yīng)引起格外關(guān)注,數(shù)據(jù)前后不一致會影響決策

3. 不同類型樣本對試劑盒的性能影響比較大,評估時(shí)應(yīng)選取蛋清、胎糞、細(xì)胞上清液等多種樣本。

4. 不同試劑盒的敏感性有區(qū)別,特別針對ALV-K的病毒復(fù)制慢的情況,高敏感性的產(chǎn)品有利于ALV-K的快速凈化。

在最后,孟藏龍表示禽白血病評比驗(yàn)證最困難的是明確樣本性質(zhì),這也是個(gè)相對專業(yè)的工作,涉及多個(gè)驗(yàn)證層面。

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