（文獻(xiàn)DOI：https://hub.pubmedplus.com/10.1093/nar/gkab683）
首先，研究團(tuán)隊(duì)利用CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)對惡性瘧原蟲ApiAp2轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子家族（人類和嚙齒動(dòng)物瘧疾寄生蟲性行為的主要調(diào)控因子)開展了系統(tǒng)的基因敲除和配子體生成能力的篩選。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與親本菌株相比，敲除了ApiAp2的菌株P(guān)F3D7 1139300(命名為pfap2-g5)pfap2-g mRNA豐度顯著增加，但配子細(xì)胞產(chǎn)生嚴(yán)重缺陷，并通過反復(fù)敲除和恢復(fù)PfAP2-G5基因水平，證實(shí)PfAP2-G5不僅是配子細(xì)胞轉(zhuǎn)化所必需的，也是配子細(xì)胞發(fā)育所必須的。
隨后，研究人員對PfAP2-G5進(jìn)行了功能及機(jī)制研究，通過染色質(zhì)免疫共沉淀和差異轉(zhuǎn)錄組分析等實(shí)驗(yàn)，鑒定了PfAP2-G5的靶基因及調(diào)控機(jī)制，結(jié)果表明：PfAP2-G5可以通過與上游區(qū)域和外顯子基因體結(jié)合抑制pfap2-g（瘧原蟲性轉(zhuǎn)換關(guān)鍵基因）基因的轉(zhuǎn)錄活性，外顯子基因體與維持局部異染色質(zhì)結(jié)構(gòu)有關(guān)，從而阻止性行為的發(fā)生，使瘧原蟲無法進(jìn)行性轉(zhuǎn)換，只能在體內(nèi)進(jìn)行無性復(fù)制。
最后，研究人員還通過實(shí)驗(yàn)證明PfAP2-G5對早期配子細(xì)胞的發(fā)育也起著重要的作用，在瘧原蟲性轉(zhuǎn)換G0階段，PfAP2-G能夠上調(diào)PfAP2-G5以及其他靶基因，使pfap2-g5在G0階段達(dá)到最大轉(zhuǎn)錄量，促進(jìn)早期配子體的發(fā)育；但是，當(dāng)瘧原蟲發(fā)育到G1階段時(shí)，PfAP2-G5能夠聯(lián)合PfAP2-G2，迅速抑制PfAP2-G及其靶基因，而這些早期配子體發(fā)育相關(guān)基因的快速關(guān)閉是配子體成熟的關(guān)鍵。
總之，本篇文章發(fā)現(xiàn)了PfAP2-G5在配子細(xì)胞發(fā)生中是不可缺少的。該因子通過與上游區(qū)域和外顯子基因體結(jié)合抑制pfap2-g基因的轉(zhuǎn)錄活性，從而阻止性行為的發(fā)生。進(jìn)一步的分析表明，PfAP2-G5在配子細(xì)胞成熟過程中是必不可少的，并導(dǎo)致pfap2-g和一組在配子細(xì)胞發(fā)育之前被pfap2-g激活的早期配子細(xì)胞基因的下調(diào)?？偟膩碚f，本研究揭示了瘧原蟲配子細(xì)胞產(chǎn)生的級聯(lián)調(diào)控，并為阻斷傳播干預(yù)提供了一個(gè)新的靶點(diǎn)。
參考資料：1.A cascade of transcriptional repression determines sexual commitment and development in Plasmodium falciparum
（文章來源：www.biodiscover.com/reaseach/738782.html）
